Поиск

понедельник, 28 сентября 2015 г.

Выделение пастерелл серовара А от кроликов-пастереллоносителей

Pasteurella multocida
Pasteurella multocida - один из самых распространенных возбудителей инфекционных болезней кроликов. Многие авторы  указывают на широкое пастереллоносительство у данного вида животного, которое достигает 30-70 %.
Поэтому различные стрессовые факторы являются причиной вспышек пастереллеза без заноса возбудителя извне.
При оценке эпизоотической ситуации необходимо знать весь пейзаж микробов, циркулирующих в данном хозяйстве. Для этой цели был разработан метод выявления кроликов-пастереллоносителей с интраназальной инстиляцией водного раствора бриллиантгрюна, который является мощным стрессором для животных.
В литературе отсутствуют данные о влиянии глюкокортикоидов, которые вырабатываются надпочечниками на действие стрессоров, на течение пастереллезной инфекции у кроликов-пастереллоносителей.
Целью нашей работы является изучение влияния синтетического глюкокортикоидного гормона дексаметазона на течение спровоцированного пастереллеза и частоту выделяемости культур от кроликов-пастереллоносителей.
Материалы и методы. В эксперименте использовали 22 кролика возрастом 3 месяца, живой массой 1,5-1,7 кг. Для изучения биологических свойств выделенныхизолятов P.multocida использовано 24 беспородных белых мышей (живая масса 16-18 г).
Для выявления кроликов-пастереллоносителей использовали метод провокации инфекционного процесса (по Розанову Н.И., 1952). Для этого каждому кролику в обе носовые полости ежедневно в течение трех суток вводили по 0,2 см3 0,5 %-ного водного раствора бриллиантового зеленого.
Выявленных кроликов-пастереллоносителей (8 голов) изолировали от здоровых животных и разделили на 2 группы по 4 головы в каждой. Животным первой группы провели дополнительную иммуносупрессию, для чего использовали дексаметазон. Данный препарат вводили внутримышечно в дозе 4 мг 2 раза в день в течение трех суток. Вторую группу животных не обрабатывали и использовали как контроль.
За кроликами вели наблюдение на протяжении трех суток. Ежесуточно проводили учет общеклинических показателей: частоту сердечніх сокращений (ЧСС), часто-ту дыхательных движений (ЧДД), ректальную температуру тела (Т).
По истечении срока наблюдений животных эутаназировали под общим нарко-зом (кетамин 100 мг + дроперидол 0,5 мг внутримышечно).
Для изоляции   P. multocida использовали биологический способ по В. И. Геведзе В.И (1989). Для этого кусочки легких  суспедировали (1:5) с 0,9% раствором натрия хлорида. Указанной суспензией в дозе 0,3 мл  заражали по 3 белые мыши (внутрибрюшинно). За  мышами наблюдали в течение 5 дней. Для изоляции чистой культуры P.multocida кровь из сердца агонирующих мышей сносили в мясо-пептонный бульон и инкубировали 24 часа.
Тинкториальные свойства изолятов P.multocida изучали путем окрашивания мазков крови из сердца павших мышей по Романовскому-Гимзе.
Суточные бульонные культуры окрашивали по Граму и Бурри-Гинсу.
Биохимические свойства изолятов P. multocida определяли согласно общепринятым методикам. Для определения способности P.multocida расщеплять сахара в качестве тест-объектов использовано ряд углеводов: сахарозу, глюкозу, мальтозу, арабинозу,лактозу,  галактозу,  трегалозу, ксилозу, инозит, рамнозу, салицин,  маннитол, дульцитол, сорбитол. Протеолитические свойства P. multocida  изучали тестами на выявление индола, сероводорода, ферментов каталазы и желатиназы.
Идентификацию изолятов P. multocida  осуществляли несерологическим методом типирования с помощью гиалуронидазы Staphilococcus aureus. С этой целью штрихом высевали суточную бульонную культуру P. multocida в чашки Петри на поверхность кровянного агара.  После чего перпендикулярно линиям первичного посева высевали 24-часовую бульонную культуру золотистого стафилококка. Чашки с посевами инкубировали в термостате при 37 С° в течение 24 часа и проводили учет роста культур.
Результаты исследований.
В результате провокации (22 головы) было выделено 8 (36,4 %) кроликов-пастереллоносителей. У указанных животных отмечали угнетение, снижение аппетита, серозно-катаральный конъюнктивит и двусторонний гнойный ринит.
Данные о динамике общеклинических показателей у обработанных и необработанных дексаметазоном кроликов отражены в таблице.
Из данных таблицы видно, что через 24 часа после введения гормона у кроли-ков-пастереллоносителей были отмечены незначительные сдвиги общеклинических показателей, которые проявлялись в виде умеренной тахикардии, тахипное, субфебрильной лихорадкой. В дальнейшем (42-72 часа) общее состояние обработанных дексаметазоном кроликов ухудшилось, что проявилось более выраженной тахикардией, тахипное, лихорадкой. Напротив, общее состояние необработанных дексаметазоном животных значительно улучшилось. Так, к концу срока наблюдений у 3 из 4 кроликовисчезли симтомы ринита и конъюнктивита; ЧСС, ЧДД и температура тела нормализовалась.
Таблица
Выявление кроликов-пастереллоносителей

  Из данных таблицы видно, что через 24 часа после введения гормона у кроли-ков-пастереллоносителей были отмечены незначительные сдвиги общеклинических показателей, которые проявлялись в виде умеренной тахикардии, тахипное, субфебрильном повышении температуры тела. В дальнейшем (42-72 часа) общее состояние обработанных дексаметазоном кроликов ухудшилось, что проявилось более выражен-ной тахикардией, тахипное, лихорадкой. Напротив, общее состояние необработанных дексаметазоном животных значительно улучшилось. Так, к концу срока наблюдений у 3 из 4 кроликов исчезли симтомы ринита и конъюнктивита; ЧСС, ЧДД и температура тела снизилась до нормальных показателей.
От кроликов-пастереллоносителей было выделено 5 культур микроорганизмов (4 культуры от обработанных и 1 культура от необработанных дексаметазоном кроли-ков). Изучаемые изоляты были представлены мелкими коккобактерирями, которые располагались в мазках одиночно, попарно,  короткими цепочками. В мазках крови из сердца мышей, окрашенных по Романовскому-Гимза, отмечена выраженная биполярность. В мазках, приготовленных из суточных бульонных культур кон-статировали мелкие грамотрицательные овоподобные палочки и  капсулу (окраска по Бурри-Гинсу).
Культуральные свойства изучали посевом расплодки бактерий на питательные среды. Культуры росли в S-форме (в МПБ вызывали легкую опалесценцию и феномен «муаровые волны» при встряхивании, на кровяном МПА – «росинчатый» рост). Изучаемый микроорганизм не вызывал гемолиза.
При изучении биохимических свойств культур установили , что они ферментирую глюкозу, декстрозу, сахарозу,  фруктозу, галактозу, маннозу до образования кислоты без газа. Не расщепляли лактозу, мальтозу, арабинозу, рамнозу, рафинозу; не расщепляли дульцит, салицин, инулин; не разжижали желатин. Все культуры были каталазо- и индолположительными.
На основании изучения  культуральных, тинкториальных и биохимических свойств выделенные изоляты были идентифицированы как P. multocida. В результате проведения типизации с использованием гиалуронидазы стаффилококка констатировали уменьшение размера и отсутствие флуоресценции колоний P. multocida, которые примыкали к линии роста золотистого стафилококка. Данное свойство характерно только для P. multocida серовара А.
Обсуждая полученные данные, необходимо отметить, что применение дексаметазона повышает частоту изоляции культур P. multocida у спровоцированных кроликов-пастереллоносителей. Однако, применение данного препарата приводит к более тяжелому течению пастереллеза, что затрудняет использование данного метода в производственных условиях.
 Интересно знать:



Иммунитет при паразитоценозах


Иммунитет при паразитоценозах
В инфекционной патологии проблемы иммунитета приобретают все возрастающее значение в условиях заметных изменений эпизоотической ситуации.Наблюдается всплеск вновь появившихся инфекций при бурной эволюции известных инфекционных болезней, происходит выраженная активизация условно-патогенных возбудителей, приобрели широкое распространение сапронозы, возрастает значение паразитоценозов. В укороченные сроки меняется эпизоотический профиль заболеваний.
Изменение эпизоотической ситуации сопряжено как с повышением патогенных свойств микробов, так и со снижением защитных свойств макроорганизма при широком распространении иммунодефицитов. Эти два фактора взаимосвязаны и взаимозависимы. Наблюдается "circulus vitiosus" ( заколдованый круг ). Паразитоценозы в свой состав включают возбудителей разной видовой принадлежности, среди них могут быть иммунодепрессанты, обуславливающие возникновение иммунодефицитов. А возникающая иммунная недостаточность в свою очередь снижает естественную резистентность организма, который превращается в питательный субстрат, где беспрепятственно размножаются условно-патогенные бактерии.
Для полного обобщения и правильного понимания сущности заразной болезни требуется принцип системности,объединяющий предмет воздействия и объект воздействия . Речь идет о необходимости комплексного изучения как этиологии заболевания,например какого-то паразитоценоза. так и самого организма,подвергшегося воздействию этого паразитоценоза.
Исследования патогенетического плана при паразитоценозах                            позволили выделить повреждающий и защитный комплексы. В повреждающем комплексе могут участвовать возбудители различной таксономической принадлежности с разными патогенными качествами. Важное значение имеет взаимодействие между сочленами повреждающего комплекса и их вредоносное действие на макроорганизм. Особое значение имеет тропизм возбудителей к лимфоидной ткани и как следствие этого возможное возникновение иммунодефицита.
Иммунодефициты представляют собой состояние недостаточности иммунной системы, которая в результате различных морфо-функциональных нарушений не обеспечивает достаточную иммунную защиту. При наличии иммунодефицита животное попадает в группу повышенного риска заболеваемости.
В роли иммунодепрессантов могут выступать вирусы болезни Гамборо, инфекционной анемии цыплят, болезни Марека, ньюкаслской болезни, чумы свиней, аденовирусной инфекции, реовирусы и др. Такими свойствами обладают возбудители ряда бактериальных инфекций: колибактериоза, пастереллеза, сальмонеллеза, хламидиоза и др., а также протозоа: кокцидиоз, криптоспоридиоз, гистомоноз и др.
Инфекционный процесс характеризуется взаимодействием инфекционного начала и макроорганизма, в котором повреждающему воздействию противостоит защитный комплекс. От состояния защитного комплекса зависит возникновение заболевания не в меньшей степени, чем от наличия повреждающего комплекса. Эти комплексы определяют возникновение и течение инфекционного процесса, от них зависит в определенной степени и эпизоотическая ситуация.
При этом не следует забывать о ятрогенном факторе, т. е. о врачебном воздействии с богатым арсеналом противомикробных и целебных средств. Это воздействие может существенно влиять как на первый,так и на второй комплекс.
В защитном комплексе основную роль играет иммунитет, вместе с которым проявляет свое действие неспецифические факторы защиты,и врачебное вмешательство с применением вакцин, сывороток, лечебных препаратов и т. д. Но решающее значение в защите организма при инфекционных заболеваниях безусловно принадлежит иммунитету, при недостаточности которого возникает состояние повышенного риска заболевания. В таких случаях активизируется повсюду распространенные слабопатогенные возбудители, формируются паразитоценозы, а возникающее заболевание приобретает зловещее течение.
Иммунодефициты в настоящее время широко распространены и часто имеют возрастную природу. Выделяют три возрастных периода. Сначала у новорожденных животных возникающие иммунодефициты могут быть обусловлены недостатком в молозиве иммуноглобулинов и лейкоцитов. Затем на 15 - 20 день возможным является исчерпанный ресурс колостральных антител при функциональной недостаточности собственной иммунокомпетентной системы молодняка. Наконец, при отъёме молодняка в результате перевода на растительный корм возможен кормовой стресс, при котором нарушается и снижается содержание иммуноглобулинов.
Эти три возрастных периода необходимо учитывать и для предотвращения иммунодефицитов. В эти сроки рекомендуется применение иммуностимуляторов при выявлении иммунной недостаточности.
В таких условиях необходимо определять иммунный статус, который является базовым показателем, определяющим устойчивость к инфекционным и соматическим заболеваниям .
Назрела объективная необходимость в количественных показателях оценки степени тяжести поствакцинального иммунодефицита. В исследованиях вакцинированных против ньюкаслской болезни цыплят было установлено снижение иммунного статуса, и как следствие этого через 2-3 недели после прививки наблюдалось обострение колибактериоза. Диагностика иммунодефицитов имеет важное практическое значение . Существуют различные методы для их выявления.
1.   По иммунному ответу, по напряженности иммунитета у вакцинированных животных путем определения титров антител в серологических реакциях.
2.   Внутрикожным тестом с введением фитогемагглютинина или туберкулина.
3.   Оценка показателей Т- и В-лимфоцитов в реакциях розеткообразования.
4.   По результатам иммуноморфологических исследований на макроскопическом уровне с определением индексов центральных лимфоидных органов.
5.   По результатам гистологических исследований центральных и периферических лимфоидных органов.
Для лечения и проофилактики иммунодефицитов применяются иммуностимуляторы, которые представлены весьма широким набором. Различают следующие виды иммуностимуляторов.
1.   Физиологические иммуностимуляторы: препараты лимфоидной ткани, тимуса, костного мозга, селезенки, крови и др.
2.   Иммуностимуляторы из микроорганизмов: нуклеинат натрия, продигиозан, бимуцилаги, БФКД и др.
3.   Растительные иммуностимуляторы: экстракты элеутерококка, эхинацеи пурпурной, пустырника, лаванды, монарды, грецкого ореха, гумат натрия и др.
4.   Синтетические препараты:                                                     '~-
Вместе с тем для перманентности иммунной защиты необходима постоянная обеспеченность молодняка полноценным кормлением и хорошими условиями содержания.
В качестве иммуностимулятора на кафедре микробиологии ХГЗВА разработан препарат ЭЛР /экстракт лимфоидный реконвалесцента/. Это водно - солевой экстракт лимфоидной ткани, изготовленный по специальной технологии.
Высокую эффективность показало совместное внутривенное применение спиртовых экстрактов молодого грецкого ореха /околоплодника/ и шиповника. Наличие в применяемых экстрактах витаминов, других биологически активных веществ и санирующих факторов обеспечивает увеличение содержания иммуноглобулинов в сыворотке крови, повышение активности иммунокомпетентных органов. При этом наблюдали снижение заболеваемости и повышение среднесуточного прироста массы тела у подопытных телят.
Для поросят разработан препарат «живая кровь», который сочетает факторы иммунной защиты стабилизированной крови реконвалесцента с добавленными некоторыми лечебно - профилактическими ингридиентами.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
При нынешней сложной эпизоотической ситуации проблемы иммунитета приобретают все возрастающее значение, отмечается усиление патогенных свойств возбудителей при широком распространении иммунодефицитов. Паразитоценозы взаимозависимы и взаимосвязаны с иммунодефицитами, в результате создается порочный круг, преодоление которого возможно с позиций иммунологии.
Важное практическое значение имеет диагностика иммунодефицитов, для лечения и профилактики которых имеется обширный набор иммуностимуляторов животного, растительного и синтетического происхождения.

Интересно знать:
 1. Комплемент как важный фактор защиты у больных с гнойно-септическими заболеваниями
2. Факторы вирулентности бактероидов и условно-патогенных бактерий
3. Эпидемиология гнойно-воспалительных госпитальных инфекций, вызванных условно-патогенными стафилококками

суббота, 26 сентября 2015 г.

Proteus vulgaris как представитель условно-патогенных бактерий

Proteus vulgaris  условно патогенная бактерия
Proteus vulgaris представляют собой палочкообразные, нитратредуцирующие, индол-, сероводород- и каталазопозитивные, грамотрицательные бактерии, которые в норме заселяет желудочно-кишечный тракт человека и животных (в низких титрах). Proteus vulgaris широко распространена в природе, она может быть найдена в почве, воде и фекалиях. Proteus vulgaris - представитель  группы  энтеробактерий и является одним из оппортунистических патогенов человека, животных и птиц. Proteus vulgaris, как известно, вызывают и осложняют инфекции мочеполового тракта. Proteus vulgaris  является также возбудителем раневой инфекции.    По данным лабораторных испытаний, Proteus vulgaris ферментирует глюкозу и амигдалин, но не сбраживает маннит или лактозу. Proteus vulgaris также дает положительный результат при осуществлении теста с метиловым красным (реакция Фогес-Проскауэра), а также является чрезвычайно подвижным микроорганизмом. Для идентификации Proteus vulgaris важное значение имеют положительные результаты тестов по утилизации серы, производства уреазы, триптофана, деаминазы и индола.  Ценным является выявление желатиназной активности и способности  сбраживать сахарозу, отсутствие лизин- и орнитиндекарбоксилазы, не способность сбраживать адонит, арабинозу, сорбит, дульцит и лактозу.
Оптимальными условиями роста этого микроорганизма в факультативно-анаэробной среде является средняя температура около 40° С. Proteus vulgaris является возбудителем протейной нозокомиальной (внутрибольничной) инфекции. Она вызывает гнойно-воспалительные процессы у пациентов с ослабленной иммунной системой или осложняет течение других болезней.
Протейная инфекция протекает совместно с другими условно-патогенными бактериями, а именно с микроорганизмами родов  Klebsiella, Enterobacter, Pseudomonas, энтерококками, стафилококками, стрептококками и т. д. Микроорганизмы родов Proteus   и Pseudomonas являются частой причиной  грамотрицательной бактериемии и сепсиса. Наличие сепсиса, связанного с инфекцией мочевыводящих путей, возникает у тяжелобольных пациентов при длительной катетеризации мочевого пузыря.
Proteus vulgaris играет важную роль в развитии мочекаменной болезни у человека, животных, птиц. Производство уреазы приводит к осаждению органических и неорганических соединений, что приводит к образованию струвитных уролитов. Струвитные камни состоят из комбинации фосфата, аммония, магния  и карбоната кальция. Поэтому использование антибактериальной терапии является важнейшим этапом лечения уролитиаза. Способность Proteus vulgaris расщеплять уреазу приводит к сильному защелачиванию мочи и дополнительному камнеобразованию. Подкисление мочи с помощью различных лекарственных веществ является важным моментом патогенетической терапии.
Для лечения болезней, обусловленных Proteus vulgaris, используют антибиотики широкого спектра действия, после предварительной лабораторной подтитровки. Высокоэффективными в отношении Proteus vulgaris  антибиотиками являются: ципрофлоксацин, цефтазидим, ампициллин-сульбактам, цефоперазон, меропенем, пиперациллин-тазобактам и уназин. Указанные антибиотики назначаются в максимальных дозировках,  например для взрослого человека, ципрофлоксацин следует вводить на уровне, по меньшей мере 2000 мг в день перорально, в отличии от "стандартной дозы" 1000 мг в день.

Интересно знать:

Условно-патогенные бактерии в современном мире

Условно-патогенные бактерии
Условно-патогенные бактерии способны вызывать болезни при определенных условиях. Указанные выше болезни проявляются у людей, животных и птиц при снижении сопротивляемости организма. Условно-патогенные микроорганизмы представлены бактериями, простейшими, грибками  и вирусами. Условно-патогенные бактерии чаще всего входят в состав нормальной микрофлоры макроорганизма человека, животтных и птиц, они гораздо реже живут в окружающей среде. Условно-патогенные бактерии имеют целый ряд факторов патогенности, способны колонизировать (заселелять) организм, обладают ярко выраженной гетерогенностью и изменчивостью популяции. Последний фактор обуславливает быстрое возникновение резистентности условно-патогенных бактерий к воздействию неблагоприятных факторов, в том числе к противомикробным препаратам. В современной медицине категория условной патогенности не является достаточно четкой. В ряде случаев патологии трудно отдифференцировать границы между группой условно-патогенных и облигатно-патогенных бактерий.
Заражение условно-патогенными бактериями обычно происходит воздушно-капельным, алиментарным, экзогенным и контактным путями, в результате аутоинфекции, а также при воздействии ятрогенных факторов, а именно: использование контаминированных инструментов для лечения и диагностики больных, когда микроорганизмы проникают непосредственно во внутреннюю среду макроорганизма, минуя естественные защитные барьеры. Инфекционный процесс развивается на фоне снижения иммунорезистентности или приобретенного иммунного ответа, чему сопутствуют тяжелые соматические болезни, большая кровопотеря, перегревание, переохлаждение и другие факторы. Условно-патогенные бактерии способны вызывать инфекционный  процесс в любых тканях и органах организма. Особенности клинической  картины вызываемых ими болезнях определяются локализацией условно-патогенных бактерий в макроорганизме.
Наиболее часто условно-патогенные бактерии являются возбудителями хирургической и внутрибольничной (нозокомиальной) инфекции (например, стафилококковой, стрептококовой, псевдомонозной), так как именно в стационарных терапевтических учреждениях создаются благоприятные условия  для их распространения. К этому следует добавить, что наличие ослабленного контингента пациентов, восприимчивых к инфицированию, также является важнейшим звеном эпидемического и эпизоотического процесса. Возрастанию роли условно-патогенных бактерии в инфекционной патологии способствовало широкое внедрение в лечебную практику антибиотиков, которые вызывают нарушение экологического баланса - взаимоотношений между представителями индигенной (нормальной) микрофлоры макроорганизма и развитие резистентности к противомикробным препаратам у микроорганизмов. Основные возбудители внутрибольничной инфекции - антибиотикорезистентные штаммы (так называемы госпитальные изоляты).

Из-за отсутствия патогномонических клинических проявлений важнейшее значение в диагностике, терапии и профилактике играют бактериологические исследования, целью которых является изоляция и идентификация возбудителей и определение их чувствительности к противобактериальным препаратам. Полимикробная этиология инфекционного процесса, вызываемого условно-патогенными бактериями, их принадлежность к естественной микрофлоре макроорганизма в значительной мере усложняют проведение бактериологического исследования и интерпретацию его результатов. Для дифференцирования возбудителей инфекционного процесса от нормальной микрофлоры используют количественные и качественные  методы определения степени контаминации исследуемого образца. Также в арсенале лабораторной диагностики разработаны количественные и полуколичественные критерии для определения основного патогена. Определение чувствительности к противомикробным препаратом проводят у этиологически значимых культур бактерий, выделенных из очага инфекции. На основании антибиотикограммы возбудителей подбирают препарат, который может быть использован для терапии. При наличии ассоциации условно-патогенных бактерий учитывают чувствительность к противомикробным препаратов всех ассоциантов, присутствующих в исследуемом патологическом материале. Серологические методы диагностики не имеют информативности, в отличии от болезней, вызванных облигатно-патогенными бактериями. При болезнях, вызванных условно-патогенными бактериями, происходит медленное накопление специфических антител и их сравнительно невысокие титры.
Лечение проводят с помощью нитрофуранов, антибиотиков, сульфаниламидов, нитрофуранов и других противомикробных препаратов. При выборе фармакологического препарата учитывают резистентность к нему возбудителей, его фармакодинамику и фармакокинетику, побочное действие на организм больного. Используют также препараты из группы иммуностимуляторов, иммунокорректоров, витаминов, метаболиков, которые повышают иммунологическую резистентность макроорганизма. Профилактика и контроль болезней, вызванных условно-патогенных бактерий, основывается на соблюдении санитарно-гигиенического режима, рациональному использованию противомикробных препаратов, уменьшающему вероятность селекции и распространения в терапевтических и хирургических отделениях антибиотикорезистентных штаммов бактерий. Специфическая иммунопрофилактика разработана для предупреждения стафилококковых инфекций, с этой целью применяют стафилококковый анатоксин, иммуноглобулин. Имеются успешные попытки разработать вакцины в отношении лечения и профилактики протейной и синегнойной инфекций.

Интересно знать:

Активность нейтрофилов и ее нарушение при гнойно-воспалительных процессах, вызванных условно-патогенными бактериями

Активность нейтрофилов при  гнойно-воспалительных процессах
Нарушения фагоцитоза стафилококков и других условно-патогенных бактерий могут быть обусловлены угнетением хемотаксиса, нарушением бактерицидных систем фагоцитов. Угнетение движения нейтрофильных гранулоцитов связывают с недостаточностью хемотаксических компонентов сыворотки крови. Тем не менее, есть данные, свидетельствующие о том, что подвижность нейтрофилов может нарушаться и ингибиторами хемотаксиса, присутствующими в сыворотке крови некоторых больных. Нарушения фагоцитарной активности нейтрофилов при гнойно-воспалительных болезнях вызваны, прежде всего, недостаточной опсонизацией микроорганизмов из-за низких концентраций нормальных антител, фракций комплемента С3 и С5; Ig G и Ig М. Изменения переваривающей функции нейтрофилов связаны с морфофункциональными нарушениями, возникающими непосредственно в фагоцитирующих клетках.
Выявленные нарушения фагоцитарной активности были различного происхождения. Функциональные нарушения нейтрофилов были иногда связаны с действием возбудителей, продуктов аутолиза и интоксикацией, сопровождающей заболевание. Вместе с этим, известно, что тяжелые нарушения лизосомальных бактерицидных систем нейтрофилов могут быть вы-званы генетическими дефектами.
Недостаточность функции фагоцитов при гнойно-воспалительных заболеваниях обусловлена свойствами факторов, часть из которых влияет непосредственно на фагоцитирующие клетки, а другие - на процессы опсонизации условно-патогенных бактерий и взаимодействие нейтрофилов с Т-лимфоцитами.
Есть данные и о числе Т- и В-лимфоцитов и отдельных субпопуляций Т-клеток (хелперов и супрессоров) при различных клинических формах гнойно-воспалительных заболеваний. Так, установлено, что многие гнойно-воспалительные заболевания сопровождаются лимфопенией, а также снижением абсолютного и относительного числа Т-лимфоцитов. Кроме снижения абсолютного количества Т-лимфоцитов, выявлено угнетение их функциональной активности, установленное с помощью реакции бласттрансформации лимфоцитов с использованием специфического митогена – фитогемагглютинина. Степень нарушения данного показателя значительно колеблется. Наиболее низкие показатели выявлены у пациентов с хроническими формами гнойно-воспалительных заболеваний. Выявлена недостаточная способность лимфоцитов подвергаться бластной трансформации и предопределять реакцию замедленного типа у больных пиодермиями.

Интересно знать:

четверг, 24 сентября 2015 г.

Pseudomonas aeruginosa как представитель условно-патогенных бактерий

Pseudomonas aeruginosa - условно-патогенная бактерия
Pseudomonas aeruginosa (палочка сине-зеленого гноя, синегнойная палочка) является представителем подвижных палочкообразных микроорганизмов, которые красятся по Граму отрицательно. Pseudomonas aeruginosa  широко распространена в природе, живет в почве и воде, условно-патогенна для птиц, млекопитающих и человека, вызывает госпитальные (нозокомиальные) инфекций у человека.
Образование пигмента, имеющего сине-зелёный цвет, является важнейшим диагностическим признаком. Пигмент Pseudomonas aeruginosa имеет название – пиоцианин.
Морфологически Pseudomonas aeruginosa  представляет собой прямые или слегка искривленные палочки с закругленными краями, имеет длину от 1 до 5 мкм, ширину  - от 0,5 до 1,0 мкм. Pseudomonas aeruginosa типичный хемоорганотроф, лофотрих или монотрих, облигатный аэроб. Растёт на обычных питательных средах, на мясопептонном агаре при росте дает окрашивание в сине-зелёный цвет, в мясопептонном бульоне дает помутнении, образует  пленку и  сине-зелёное окрашивание). Оптимальная температура роста 37 °C, но неплохо растет и при 42 °C. В отношении Pseudomonas aeruginosa используется селективная среда: питательный агар с цетилперидиниум-хлоридом (так называемый ЦПX-агар). Синтезирует протеолитические ферменты. На поверхности твёрдых питательных сред растет в виде трех форм, а именно: R, S и M (диссоциация по колониальным свойствам). Pseudomonas aeruginosa в процессе жизнедеятельности синтезирует характерные пигменты – пиоцианин (дает сине-зелёное окрашивание, растворяется в хлороформе), пиовердин (желто-зелёного цвета, дает флюоресценцию при ультрафиолетовом освещении) и пиорубин (бурый цвет). Pseudomonas aeruginosa весьма резистентна к действию большинства дезинфектантов, в некоторых из них может даже расти. Эффективным в отношении синегнойной палочки является 5%-ый раствор хлорамина, 3%-ый раствор перекиси водорода, а также 2%-ый раствор карболовой кислоты (фенола).
Синегнойная инфекция представляет собой болезнь инфекционной  природы, которая вызывается бактериями рода Pseudomonas, характеризующаяся поражением органов респираторной системы, пищеварительного тракта, кожи и мышц, нервной ткани.
Синегнойная палочка может быть комменсалом, а в определенных ситуациях становится условно-патогенной или даже патогенной  для человека, животных и птиц. Является возбудителем хирургической инфекции и гнойно-воспалительных   заболеваний (гнойная рана, абсцесс, флегмона, пиодермия), часто является причиной цистита, нефрита, гастроэнтероколита.
 При ослаблении иммунорезистентности  (хронические заболевания, операция, травма,  инфекция, интоксикация) Pseudomonas aeruginosa  вызывает внутрибольничные инфекции. Pseudomonas aeruginosa  можно выделить из респираторного тракта  человека, животных и птиц, а также из толстого кишечника,  наружного слухового прохода, а также с  кожи, особенно в области кожных складок. При нормальной иммуннорезистентности рост Pseudomonas aeruginosa  угнетают представители нормальной микрофлоры кишечника, ассоциации которой формирую колонизационную резистентность.
Факторы патогенности Pseudomonas aeruginosa  обусловлены  активной подвижностью за счет наличия жгутиков, токсигенностью, высокой резистентностью к ряду противомикробных средств (образование вокруг  колоний слизеподобного гликокаликса), что существенно затрудняет эффективность лечебных мероприятий у таких больных.
Этиотропная антибиотикотерапия остается достаточно сложной в отношении  Pseudomonas aeruginosa. Повсеместно встречаются антибиотикоустойчивые  изоляты. В наше время имеется арсенал противомикробных препаратов, которые при Pseudomonas aeruginosa-инфекции обладают высокой эффективностью: цефтазидим, цефепим, имипинем, карбапинем, амикацин и ципрофлоксацин. Неэффективен тетрациклин, к левофлоксацину довольно быстро формируется антибиотикорезистентность. Используется также симптоматическая и патогенетическая терапия.
Основа профилактики инфекций, обусловленных Pseudomonas aeruginosa, является недопущение или снижение активности иммунодефицитных состояний, дезинфекция, недопущение распространения госпитальных инфекций.

Интересно знать:

вторник, 22 сентября 2015 г.

Escherichia coli как представитель условно-патогенных бактерий

Escherichia coli условно-патогенная бактерия
Escherichia coli (от латинского - E. coli - кишечная палочка) представляет собой  вид палочкоподобных бактерий, которые по Грамму красятся отрицательно.
Escherichia coli довольно широко распространена в толстом отделе кишечника птиц и млекопитающих. Превалирующее число изолятов Escherichia coli являются абсолютно безвредными или даже полезными (нормальные кишечные палочки могут проявлять антагонистические свойства по отношению к патогенным Escherichia coli), однако, следует отметить, что серотип O157:H7 является причиной тяжёлых токсикоинфекций  у людей, молодняка животных и птенцов. Большинство изолятов Escherichia coli являются представителями нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта человека и животных. Escherichia coli приносит несомненную пользу макроорганизму. Так, эта бактерия участвует в синтезе филлохинона (витамин K), а также подавляет рост патогенных бактерий в кишечнике, формируя колонизационную резистентность макроорганизма.
Escherichia coli способна в течение некоторого периода времени выживать в природе вне организма, что делает ее важнейшим индикатором для анализа проб на наличие или отсутствие фекальной контаминации. Escherichia coli достаточно легко культивируются в лабораторных условиях, что делает ее удобным объектом для проведения генетических исследований. С одной стороны Escherichia coli является моделью для микробиологических исследований, с другой стороны – она одна из наиболее изученных бактерий-прокариотов, а также одним из важнейших объектов бактериологии, эпизоотологии, эпидемиологии и биотехнологии.
Впервые Escherichia coli выделил и описал педиатр-бактериолог Т. Эшерихом (Германия) в 1885 году. Escherichia coli принадлежит к роду Escherichia (эшерихий), семейства Enterobacteriaceae (энтеробактерий).
Различные штаммы Escherichia coli в большинстве случаев специфичны к конкретным хозяевам, что в некоторых случаях дает возможность определить источник контаминации фекалиями (например, штаммам эшерихий, выделенных из воды, можно выявить источник контаминации, а именно, человек, птица или млекопитающее).
В природе в процессе мутаций появляются новые штаммы Escherichia coli. Некоторые изоляты в процессе эволюции приобретают  патогенные свойства и способность к паразитическому способу существования. Вирулентные штаммы Escherichia coli являются причиной желудочно-кишечных болезней, которые особо опасны для детей, молодняка животных и птенцов. В некоторых случаях эшерихиозные гастроэнтероколиты могут приводить к летальному исходу. Высокопатогенные штаммы (особенно, O157:H7) являются причиной тяжелейших болезней и высокой летальности даже у пожилых людей и лиц со  сниженной иммунорезистентностью).
Escherichia coli представляет собой грамотрицательный микроорганизм из группы факультативных анаэробов, спор не образует. Прокариотическая клетка палочкообразной формы, концы ее несколько закруглены. Размер Escherichia coli 0,4—0,8 × 1—3 мкм. Escherichia coli может жить и размножаться на разных питательных субстратах.
В отсутствии оксигена (анаэробные условия)  Escherichia coli образует в качестве метаболитов сукцинат, лактат, ацетат, этанол, углекислоту, водород.
Оптимальная температура культивирования Escherichia coli 37 °C, некоторые изоляты способны размножаться при температуре до 49 °C.
Подвижные штаммы Escherichia coli имеют жгутики-перитрихи, на концах которых имеется протеин FimH, который имеет способность к прикреплению к молекулам сахаров.
Escherichia coli в норме заселяет желудочно-кишечный тракт новорождённых 24-48 часов после рождения, поступая с молозивом матери. Эта бактерия хорошо приживается и сохраняются на протяжении всей жизни. Концентрация Escherichia coli в содержимом кишечника составляет 106—108 КОЕ/г.  В желудочно-кишечном тракте Escherichia coli хорошо прикрепляется к слизистой оболочке.
Апатогенный штамм Nissle 1917 эшерихий  широко используется в гуманной медицине как пробиотик для лечения желудочно-кишечных болезней  новорождённых.
Escherichia coli является одним из первых микроорганизмов, чей геном был полностью расшифрован.
Условно-патогенные бактерии Escherichia coli, в норме в высоких концентрациях населяют кишечник, но могут инициировать развитие болезни при занесении в другие органы или полости организма. Если Escherichia coli попадает через повреждения желудочно-кишечного тракта в брюшную полость – возникает перитонит. При контаминации влагалища женщины, Escherichia coli может вызвать или осложнить кольпит, вагинит. Попадая в простату она может вызвать острый или хронический простатит.
Escherichia coli высокочувствительна к таким противомикробным препаратам, как стрептомицин или гентамицин, но может быстро приобретать антиотикорезистентность.
Патогенные изоляты Escherichia coli в норме отсутствуют в желудочно-кишечном тракте. Путь заражения – алиментарный. Передача патогенных Escherichia coli осуществляется фекально-оральным путём. Патогенные штаммы Escherichia coli могут вызывать гастроэнтероколиты, уретриты, вагиниты, баланопоститы, маститы, нефриты, а также менингоэнцефалит у новорождённых. Иногда патогенные изоляты также вызывают гемолитико-уремический синдром, перитонит, сепсис и эшерихиозную пневмонию.
Ряд штаммов Escherichia coli (O157, O121, O104) обладают токсигенностью (образуют токсины). Токсикоинфекции, вызванные Escherichia coli, обычно развиваются при  употреблении в пищу загрязненных возбудителем овощей или плохо прожаренного мяса.
Природными резервуарами Escherichia coli  штаммов O157:H7 является крупный и мелкий рогатый скот и другие домашние животные. Для лечения, болезней, вызванных Escherichia coli, используется фаго- и антибиотикотерапия. Высокоэффективными являются гипериммунные сыворотки. Для профилактики эшерихиозов эффективны вакцины.

Интересно знать:

Иммунологическая оценка при гнойно-воспалительных заболеваниях

 Актуальные показатели иммунной системы, которые необходимо оценивать при гнойно-воспалительных заболеваниях.


Иммунологическая оценка  при гнойно-воспалительных заболеваниях
Многочисленными исследованиями последних лет установлено, что возникновение различных клинических форм гнойно-воспалительных заболеваний сопровождается изменением показателей иммунного гомеостаза. Подобным изменениям принадлежит важная роль в патогенезе гнойно-воспалительных заболеваний, во многом определяя тяжесть течения и исход заболевания. При изучении иммунного статуса следует дифференцированно подходить к оценке активации иммунной системы, пролиферативной активности и фагоцитоза. Так, для определения активации иммунной системы авторы предлагают изучать экспрессию DR-антигенов HLA, рецепторов интерлейкина-2, трансферрина, уровень цАМФ и других внутриклеточных мессенджеров. Для оценки пролиферативной активности рекомендуют использовать ответ лимфоцитов на Т- и В-митогены и т.п. При изучении Т-системы нужно, прежде всего, оценивать способность Т-лимфоцитов продуцировать цитокины. При оценке фагоцитоза главным показателем является способность фагоцитов убивать и переваривать бактерии. При оценке В-системы иммунитета важно определять не только уровни основных классов иммуноглобулинов, субклассов Ig G и титров антител к различным возбудителям, но и такие свойства иммуноглобулинов, как афинность и гликозилирование, от которых в значительной степени зависит их способность выполнять свои эффекторные функции.
Клинико-иммунологические, электронно-микроскопические и бактериологические исследования, проведенные в последние годы, позволили в целом расширить представление о состоянии иммунологической реактивности организма больных, которые страдают гнойно-воспалительными заболеваниями, и выявить некоторые особенности их течения.
Отмечен дисбаланс иммунных показателей как клеточного, так и гуморального звена антигенспецифической защиты. Существенно влияет на реактивность больных интоксикация организма бактериальными токсинами и продуктами аутолиза тканей, которые проникают в общий кровоток из очагов поражения. Вследствие этого возникают метаболические нарушения: гипопротеинемия, гипоальбуминемия, нарушение кислотно-щелочного состояния. Установлено также значительное снижение активности некоторых показателей неспецифической резистентности - пропердина, комплемента, β-лизина, показателей фагоцитарной активности нейтрофилов.
Так, результаты проведенных исследований свидетельствуют о снижении показателей завершенности фагоцитоза в этих случаях. Наиболее низкие показатели (фагоцитарное число, фагоцитарный индекс) наблюдались у больных хроническими инфекциями. Нарушение фагоцитарной активности клеток на ранних этапах развития гнойно-воспалительных заболеваний создает благоприятные условия для адаптации и размножения возбудителей, а в дальнейшем способствует распространению очагов поражения и хронизации заболевания.

Интересно знать:

понедельник, 21 сентября 2015 г.

Фармакологическое обоснование сочетанного использования противомикробных и противовоспалительных средств при заболеваниях, обусловленных условно-патогенными бактериями

Актуальность сочетанного использования противомикробных и противовоспалительных средств при  заболеваниях, обусловленных условно-патогенными бактериями


Сочетанное использование противомикробных и противовоспалительных средств при  заболеваниях, обусловленных условно-патогенными бактериями
Заболеваниям кожи и наружных слизистых оболочек принадлежит главное значение в общем определении современной клинической и экспериментальной медицины. Отличаючись нозологическим или неспецифическими проявлениями воспаления, имея соответствующий бактериальную, вирусную, аллергическую соматическую или эндокринную этиологию, дерматиты возникают как первичный патологический процесс или представляют собой кожные осложнения основного заболевания и вследствие этого дифференцируются между собой по особенностям клинико-патогенетического течения. Из этого получаются составные в выявлении обоснования по особенностям этиологии и патогенеза эффективной фармакотерапии инфекционно-аллергических и гнойно-воспалительных заболеваний кожи и наружных слизистых оболочек
Вне зависимости от характеристик этиологии, патогенеза и патологоанатомических проявлений, клинико-патогенетического течения инфекционно-аллергических и гнойно-воспалительных болезней патогенетически определяет, где будут возникать и усиливатся процессы воспаления. Исходя из этого, основу фармакологической терапии вышеуказанных болезней базово определяет комплексное использование противомикробных и противовоспалительных препаратов без учета совместимости по основным и сопутствующими фармакологическими свойствами. Между тем, согласно единичным, несистематизированным сообщениям отдельным антибиотикам сопутствующее присущи противовоспалительные, а некоторых случаях нестероидным противовоспалительным препаратам и глюкокортикоидам - соответствующие противомикробные свойства.
Экспериментальное и теоретическое доказательство закономерностей синергический биосовместимости между противомикробными и противовоспалительными препаратами по основными и сопутствующими фармакологическими свойствам приобретает особую актульность в связи с тем, что на фоне позитивных выводов открываются перспективы существенного повышения эффективности лечения больных с гнойно-воспалительными  болезнями, к пересмотру дозозависимых соотношений между этими препаратами в составе комплексных схем лечения и к снижению или нивелированию побочных микробиологических и фармакологических эффектов, соответственно присущи каждому из компонируемых препаратов.

Интересно знать:
1. Staphylococcus aureus как представитель условно-патогенных бактерий.
2. Антилизоцимная активность при хирургической инфекции и гнойно-септических процессах.
3. Факторы вирулентности бактероидов и условно-патогенных бактерий.

воскресенье, 20 сентября 2015 г.

Staphylococcus aureus как представитель условно-патогенных бактерий

Staphylococcus aureus как представитель условно-патогенных бактерий
Staphylococcus aureus (золотистый стафилококк) — вид коккоподобных (имеющих сферическую форму) бактерий из рода Staphylococcus, которые по Граму красятся позитивно. По некоторым данным около 25—40 % популяции людей, животных и птиц являются постоянными носителями бактерии этого вида.  Staphylococcus aureus  может сохраняться и даже размножаться на поверхности кожны и слизистых оболочках респираторного, урогенитального, желудочно-кишечного трактов.
Staphylococcus aureus является причиной широкого диапазона болезней, а именно: ринит, гайморит, фронтит, трахеит, бронхит, ларингофарингит, пневмония, плеврит, угри, импетиго (наряду со Streptococcus pyogenes), фурункул, флегмона, карбункул, ожогоподобный стафилококковый кожный  синдром и абсцесс — до смертельно опасных патологий: метастатическая пневмония, менингит, остеомиелит, медиастенит, эндокардит, инфекционно-токсический шок и сепсис. Широта спектра болезней простирается от поражения кожи, воспаления мягких тканей, респираторных,  суставных, костных и васкулярных до хирургических инфекций. Staphylococcus aureus является одним из четырёх наиболее частых возбудителей госпитальных инфекций. Он часто вызывает послеоперационные раневые инфекции.
Впервые изолирован в 1880 году в г. Абердине (Шотландия)   А. Огстоном  из экссудата гнойных абсцессов. Впервые детально изучен в 1884 году О. Розенбахом (Германия).
Свое название Staphylococcus aureus получил из-за своего внешнего вида под микроскопом. Дифференциальным признаком являлось то, что от большинства микроорганизмов, которые бесцветны, Staphylococcus aureus имеет характерный золотистый цвет. Это явление объсняется наличием особых пигментов, близких к каротиноидам.
Staphylococcus aureus — микроорганизм-комменсал. Staphylococcus aureus колонизирует поверхности кожи и слизистых оболочек (респираторный, желудочно-кишечный и урогенитальный тракты). В обычных условиях наличие   Staphylococcus aureus на слизистых оболоках носа или на поверхности кожи не вызывает ответа организма.
Staphylococcus aureus является возбудителем огромного количества инфекций и воспалительных внутренних, хирургических и гинекологических болезней. Занимает лидирующие место среди микроорганизмов, которыми наиболее часто заражаются в лечебных учреждениях. Например, только в Америке диагностируют более ста тысяч случаев заражения золотистым стафилококком в год, большинство из них заканчиваются смертельным исходом.
Со дня внедрения пенициллина в медицинскую и ветеринарную практику и активного его использования в отношении золотистого стафилококка и других условно-патогенных бактерий, под воздействием естественного отбора в его популяции закрепилась мутация, в связи с которой в настоящее время превалирующее большинство штаммов резистентны к антибиотикам пенициллинового ряда. Это произошло из-за наличия у Staphylococcus aureus фермента пенициллиназы, который расщепляет бета-лактамное ядро молекулы пенициллина. Для контроля этого микроорганизма широко применяют метициллин, синтетический аналог пенициллин, который  не разрушается пенициллиназой стафилококков. Однако, в настоящее время  распространены штаммы Staphylococcus aureus, устойчивые к метициллину. Из-за этого явления штаммы золотистого стафилококка дифференцируют на метициллин-чувствительные и метициллин-устойчивые. Кроме этого, в последнее время появились ванкомицин-резистентные  и гликопептид-резистентные штаммы Staphylococcus aureus.
Staphylococcus aureus имеет более 2500 генов и 2,7 миллиона пар оснований в своем геноме. Длина хромосомы Staphylococcus aureus составляет 0,5—1,0 мкм.
Для лечения стафилококкоза людей, животных и птиц (инфекционная болезнь, вызываемая золотистым стафилококком) используется стафилококковый бактериофаг, который представляет собой жидкую питательную среду, в которой находятся вирусы-фаги, уничтожающие стафилококки.
Кроме этого, для лечения болезней, вызванных Staphylococcus aureus, используют стафилококковый анатоксин или иммуноглобулин. Указанные препараты лучше использовать в комплексе с противомикробными препаратами широкого спектра действия после подтитровки чувствительности выделенного штамма стафилококка к антибиотикам. Значительно снижают метициллинрезистентность у Staphylococcus aureus после воздействия на них меди и ее солей.

Интересно также знать:

пятница, 18 сентября 2015 г.

Бактериологическая диагностика при болезнях, вызванных условно-патогенными бактериями

Микробиологические методы исследования условно-патогенных бактерий.
Исследование осуществляется с использованием бактериоскопического и бактериологического метода.
Критерием этиологической значимости возбудителей гнойно-воспалительных болезней являются титры КОЕ/мл (колониеобразующих единиц). Этиологически значимыми патогенами условно-патогенных бактерий считалются те, для которых титры составляли 5 lg КОЕ/мл и более. В обычных исследованиях концентрация для условно-патогенных бактерий, выделенных в монокультуре, составляют 7-8 lg КОЕ/мл. При смешанных бактериальных инфекций титры изолированных условно-патогенных бактерий составлют 5-7 lg КОЕ/мл. Микроорганизмы, изолированные в концентрациях менее 5 lg КОЕ/мл (4 lg и ниже) интерпретируют как контаминационные.
Выявление родовой принадлежности изолятов и видовую идентификацию условно-патогенных бактерий осуществляют согласно “Определителя бактерий Берджи”.
Идентификацию условно-патогенных бактерий рода Staphylococcus осуществляют с помощью диагностического набора  «СТАФИ-тест-16» (производства фирмы Микро-ЛА-Тест, АО «Лахема», Чехия).
Установление принадлежности выделенных изолятов к роду Streptococcus и Enterococcus и идентификацию  условно-патогенных стрептококков и энтерококков осуществляют путем использования диагностических наборов «СТРЕПТОтест-16» и «ЭН-коккус» производства той же фирмы.
Выявление принадлежности выделенных изолятов к родам Moraxella и Acinetobacter семейства Neisseriaceae и видовую идентификацию условно-патогенных моракселл и ацинетобактеров проводят с помощью культурального и биохимического методов исследования, а также используя диагностического набора «НЕЙССЕРИЯтест (стриппированный)» производства фирмы Микро-ЛА-Тест, АО «Лахема», Чехия.
Идентификацию условно-патогенных энтеробактерий осуществляют используя диагностический набор «ЭНТЕРОтест 24 (стриппированный)», «ЭНТЕРОтест 16 (стриппированный)», «КОЛИтест» производства фирмы Микро-ЛА-Тест, АО «Лахема»Ò, Чехия.

Фагоцитоз как эффективное действие иммунной системы против условно-патогеннных бактероидов

Показано, что Bacteroides fragilis и некоторые другие бактероиды резистентны к лизоциму. Bacteroides fragilis и Prevotella melaninogenicus способны угнетать активность фагоцитирующих клеток по отношению к другим микроорганизмам, например, к Proteus sp. Ингибирующее действие бактероидов на фагоцитоз других бактерий было подтверждено в исследованиях. Авторы полагают, что такое действие бактероидов на фагоцитоз целиком зависит от их влияния на систему комплемента.
Соответственно современным представлениям, адекватный иммунный ответ возможен только при условии согласованного взаимодействия макрофагов и различных субпопуляций лимфоцитов. Существует предположение, что функциональная настройка этих субпопуляций осуществляется сигналами, которые выделяются взаимодействующими в процессе иммунного ответа клетками. Для многих из гуморальных факторов, таких, на-пример, как интерферон, доказано, что действие их на клетки опосредовано через систему циклических нуклеотидов - универсальных внутриклеточных биологических регуляторов обменных процессов. При фагоцитозе Staphylococcus aureus моноцитами человека установлено снижение активности аденилатциклазы и повышение активности фосфодиэстеразы, свидетельствующее об участии в процессе фагоцитоза циклического аденозин-5,5-монофосфата.
Потеря способности бактерий синтезировать полноценный липополисахарид О-антигена сопровождается потерей их вирулентности.
Похожие публикации:

четверг, 17 сентября 2015 г.

Роль условно-патогенных бактерий как фактора возникновении дисбактериоза влагалища

Известно, что индигенная микрофлора открытых полостей имеет существенное значение в поддержании иммунного статуса и гомеостаза организма. Нарушение микроэкологического равновесия различных биотопов приводят к серьезным осложнениям и дисфункции различных систем органов. Так, нарушение состава микробиоценоза репродуктивного тракта, в том числе и влагалища роженицы, может привести к колонизации организма ребенка условно-патогенными и патогенными микроорганизмами при прохождении плода через половые пути женщины и при грудном вскармливании, что может опосредовать возникновения дисбактериоза или инфекционно-воспалительного процесса у ребенка .
Нарушение состава микрофлоры генитального тракта, как известно, вызывают негативное воздействие на репродуктивное здоровье женщины и физиологическое течение беременности. Нормальная микрофлора влагалища выступает как фактор неспецифической защиты макроорганизма (колонизационная резистентность) от проникновения патогенов. Нарушение ее качественного и количественного состава (дисбактериоз) - позволяет проникновения микроорганизмов, опосредующих возникновения инфекционных заболеваний репродуктивной системы, этиологическим фактором которых могут выступать бактерии разных групп.
Дискуссионным является вопрос о значимости причин и механизмов возникновения дисбактериозов, а также клинической интерпретации указанных выше состояний. Относительно факторов, которые вызывают дисбактериоз влагалища, существуют следующие точки зрения: снижение функциональной активности иммунокомпетентных клеток; нарушение гормонального фона и влияние других эндогенных факторов, которые, на фоне неблагоприятных условий жизни, приводят к чрезмерному развитию условно-патогенных бактерий по сравнению с сапрофитными микроорганизмами; чрезмерное воздействие экзогенных факторов, таких как условно-патогенные и патогенные микроорганизмы, а также нерациональная антибиотикотерапия вызывают расстройство в системе микробиоценоза влагалища.
Изучение дисбактериоза у больных не позволяет определить начальные механизмы возникновения этого явления: у таких пациенток, как правило, имеет место определенная патогенетический цепь, которая охватывает различные системы организма. Поэтому перспективным представляется применение экспериментальных моделей дисбактериоза на животных.
Известно, что экспериментальная модель имеет широкие возможности при изучении любого типа патологии. Наряду с клиническим и эпидемиологическим наблюдениям опыты на животных способствуют расширению знаний о свойствах микроорганизмов и их взаимодействие между собой и с организмом-носителем. Также модели на животных можно использовать для изучения процессов, происходящих в латентном периоде развития болезни, при испытании новых препаратов и т.д. 
Моделирование патологических состояний на животных требует учета многих факторов: при этом исследованиям подлежат разные стороны реактивных процессов организма. Экспериментальная модель на животных позволяет исследовать большинство процессов ответа макроорганизма, обусловленных многими факторами экзо- и эндогенной природы. В общем, моделирование используется для изучения сложных механизмов патогенеза, морфогенеза и иммуногенеза болезни. Еще одним важным аспектом разработки модели на животных является дальнейшее сравнение ее со случаями заболевания человека, ведь достичь идентичности в клинико-морфологическом отношении почти невозможно. В лабораторных исследованиях в основном используют мышей и крыс, которые считаются близкими к человеку в генетическом плане.
Для всестороннего изучения проблемы возникновения и развития дисбактериоза влагалища необходимо проведение серий экспериментов, направленных на создание модели дисбактериоза влагалища экспериментальных животных под действием различных факторов. Создание такой модели позволит выяснить большинство проблемных вопросов о роли отдельных видов микроорганизмов, антибиотиков и имуносупресантов в качестве факторов дисбактериоза. Понимание этих механизмов может способствовать разработке методов профилактики и лечения нарушений экологического равновесия микрофлоры влагалища.

Активность фагоцитоза и факторы иммунной защиты относительно условно-патогенных бактерий

Показано, что Bacteroides fragilis и некоторые другие бактероиды резистентны к лизоциму. Bacteroides fragilis и Prevotella melaninogenicus способны угнетать активность фагоцитирующих клеток по отношению к другим микроорганизмам, например, к Proteus sp. Ингибирующее действие бактероидов на фагоцитоз других бактерий было подтверждено в исследованиях. Исследователи полагают, что такое действие бактероидов на фагоцитоз целиком зависит от их влияния на систему комплемента.
Соответственно современным представлениям, адекватный иммунный ответ возможен только при условии согласованного взаимодействия макрофагов и различных субпопуляций лимфоцитов. Существует предположение, что функциональная настройка этих субпопуляций осуществляется сигналами, которые выделяются взаимодействующими в процессе иммунного ответа клетками. Для многих из гуморальных факторов, таких, например, как интерферон, доказано, что действие их на клетки опосредовано через систему циклических нуклеотидов - универсальных внутриклеточных биологических регуляторов обменных процессов. При фагоцитозе Staphylococcus aureus моноцитами человека установлено снижение активности аденилатциклазы и повышение активности фосфодиэстеразы, свидетельствующее об участии в процессе фагоцитоза циклического аденозин-5,5-монофосфата.
Потеря способности бактерий синтезировать полноценный липополисахарид О-антигена сопровождается потерей их вирулентности.
Фракции белков внешней мембраны Shigella flexneri 2а 516 pSF140+ проявляют иммуностимулирующее действие на интенсивность гемопоэза, о чем свидетельствует стимуляция эндоколониеобразования, нарастание в костном мозге числа колониеобразующих единиц и увеличение пула пролиферирующих единиц, образующих колонии, усиленная миграция лейкоцитов в кровь. В ранние сроки после введения показано иммуностимулирующее влияние белков внешней мембраны на функциональную активность эффекторных В-лимфоцитов. Вирулентные Shigella flexneri 2а, в отличие от невирулентных, способны угнетать иммунологическую память. В безмикробных фильтратах бульонных культур вирулентных шигелл есть факторы, способствующие проявлению указанного иммуносупрессивного свойства невирулентных шигелл этого серовара. Факторы, определяющие иммуносупрессивность Shigella flexneri 2а, тесно связаны с О-антигеном шигелл.

понедельник, 14 сентября 2015 г.

СТИМУЛЯТОРЫ РОСТА PASTEURELLA MULTOCIDA

 СТИМУЛЯТОРЫ РОСТА PASTEURELLA MULTOCIDA

СТИМУЛЯТОРЫ РОСТА PASTEURELLA MULTOCIDA
Известно, что жизнедеятельность микроорганизмов заключается в обмене веществ и энергии между клетками паразита и внешней средой под влиянием крайне разнообразных как внешних физических и химических, так и внутренних биохимических факторов. Поэтому питательные среды должны способствовать обмену веществ, накоплению бактериальных клеток и не должны изменять биологических, иммуногенных, антигенных, вирулентных и других свойств бактериальных культур.
Создание высокоактивных противопастереллезных вакцин, сывороток и других специфических и иммунопрофилактических препаратов неразрывно связано с изучением биологических свойств пастерелл на питательных средах. В микробиологической практике издавна используются аутолизат дрожжей, кровь и сыворотка крови как стимуляторы роста бактерий.
 Дрожжевой аутолизат является источником витаминов и других факторов роста, в том числе пуринов и пиримидинов. Он также служит донором катионов. Среды, содержащие кровь и её компоненты, используются как источник гематина, кофермента I, аминокислот, микроэлементов и ряда других факторов. Как известно, кровь также обладает эффективной буферной и окислительно-востановительной системами.
 Многими исследователями определено положительное влияние аутолизата дрожжей, крови и сыворотки крови на рост и биологические свойства пастерелл. Однако, в доступной нам литературе отсутствуют сведения о силе, достоверности и закономерностях влияния данных факторов на рост P.multocida.
 Проведенными исследованиями изучено позитивное стимулирующего влияние дрожжевого аутолизата, дефибринированной крови и сыворотки крови на интенсивность роста P.multocida. Путем проведения дисперсионного и регрессионного анализов полученных экспериментальных данных и определена мощное  и достоверное влияния данных факторов на накопление бакмассы пастерелл.

ХАРАКТЕРИСТИКА ИЗОЛЯТОВ PSEUDOMONAS AERUGINOSA, ВЫДЕЛЕННЫХ ПРИ РАЗНООБРАЗНЫХ ПАТОЛОГИЯХ У ДОМАШНИХ И СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ



ХАРАКТЕРИСТИКА ИЗОЛЯТОВ PS. AERUGINOSA

ХАРАКТЕРИСТИКА ИЗОЛЯТОВ PSEUDOMONAS AERUGINOSA


Из литературных источников известно, что Pseudomonas aeruginosa обладает высокой приспособляемостью к окружающей среде, а также вызывает заболевания с различными клиническими проявлениями у людей и животных. Значение синегнойной палочки, как этиологического агента при различных патологиях у животных, определяется не только достаточно высокой частотой её выделения, но и тяжестью течения вызываемых ею заболеваний и осложнений, а также трудностями, возникающими при определении чувствительности к химиопрепаратам.
В результате наших исследований был выделен 201 представитель семейств Enterobacteriaceae, Pseudomonadaceae, Micrococcaceae, в том числе 15 изолятов Ps. aeruginosa, что составило 7,5% от общего числа штаммов. 2 изолята выделено при конъюнктивите, по 3 – из гнойных ран брюшной стенки и задней конечности, по 2 – из селезенки, кишечника и фекалий, 1 изолят – из легких. У 93,3% изолятов синегнойной палочки наблюдали типичные для данного возбудителя культуральные свойства: ползучий рост, наличие зеленого или синего пигмента, запах триметиламина и феномен «радужного лизиса» колоний. Эти культуры имели типичные для вида биологические свойства: образовывали цитохромоксидазу, окисляли глюконат кальция, глюкозу в аэробных условиях, росли при 42 градусов С, разжижали желатин. Беспигментную культуру выделили 1 (6,7%). Она также обладала характерными для Ps. aeruginosa свойствами, одноко дополнительно дифференцировали от протеев по отсутствию фенилаланиндезаминазной активности. Все изоляты синегнойной палочки обладали средневыраженной β-гемолитической активностью на агаре Цейсслера, а также вызывали гибель мышей через 24-46 часов при внутрибрюшинном введении. В 40% Ps. aeruginosa выделялась в ассоциации с другими возбудителями. Наиболее часто встречались ассоциации Staph. aureus, Staph. epidermidis, Ps. aeruginosa, а также E. coli, Ps. aeruginosa и Kl. pneumoniae, Ps. аeruginosa. При анализе антибиотикочувствительности выделенных штаммов  синегнойной палочки установлено, что при тестировании 29 антибактериальных препаратов, у 46,7% изолятов антибиотикорезистентность составила более 70%.
У изолята №39 чувствительность выявлена только к 4 препаратам, то есть антибиотикорезистентность составила 89,3%. У всех изолятов Ps. аeruginosa выявлена высокая чувствительность к ципрофлоксацину. Поэтому в каждом конкретном случае при назначении антибиотикотерапии необходимо определять чувствительность микроорганизмов к данным препаратам, из-за возможности формирования штаммов синегнойной палочки, устойчивых ко всем применяемым препаратам. Таким образом, синегнойная палочка имеет важное этиологическое значение при различных патологиях у животных как в ассоциациях с представителями энтеробактерий и кокковой микрофлорой, так и самостоятельно.

воскресенье, 13 сентября 2015 г.

Чувствительность условно-патогенных бактерий к действию фотосенсибилизатора на базе порфирина

Чувствительность условно-патогенных бактерий к действию фотосенсибилизатора на базе порфирина

Чувствительность условно-патогенных бактерий к действию фотосенсибилизатора на базе порфирина


В последние годы большое беспокойство вызывает быстрый рост антибиотикорезистентности микроорганизмов, обусловленное бесконтрольным и широким  применением противомикробных препаратов. Таким образом актуальным является  изобретение принципиально новых средств противомикробной терапии, активных в отношении основных возбудителей инфекционных заболеваний человека и животных. Высокоперспективной группой соединений считают синтетические порфирины, которые уже в течение продолжительного времени применяются как фотосенсибилизаторы в фотодинамической терапии опухолевых заболеваний. Фотосенсибилизаторы представляют собой молекулы, которые способные поглощать свет с определенной длиной волны и вызывать продукцию активных форм кислорода, которые являются цитотоксическими для клеток-мишеней. Последние исследования в этой области указывают на возможность существенного расширения сферы применения такой терапии за счет использования указанного подхода для лечения инфекционных заболеваний человека и животных, вызванных бактериальными (условно-патогенными микроорганизмами), вирусными и грибковыми возбудителями. Теоретические и экспериментальные данные свидетельствуют о том, что порфирины и их металлокомплексы способны вызвать фотоиндуцированную гибель бактериальных клеток. Важно, что эти эффекты проявляются и на антибиотикорезистентных штаммах микроорганизмов.
Вместе с тем, данные о темновой активности тетрапирролов, не требуещей активации светом, в доступной научной литературе отсутствуют. К сожалению, в современной медицине и ветеринарии такие исследования не проводятся . Поэтому весьма актуальным является исследование чувствительности условно-патогенных бактерий к отечественным фотосенсибилизатором с антимикробным действием и изучения темновых эффектов этих соединений.
Антибактериальная активность синтетических порфиринов исследована нами на 24 штаммах условно-патогенных бактерий 6 видов. Среди них 4 эталонные коллекционные штаммы с известной чувствительностью к антибиотикам, и 20 полирезистентных штаммов (6 коллекционных и 14 клинических изолятов). Установлено, что все отобранные штаммы, кроме эталонных, резистентных к полимиксинам, макролидам, тетрациклину, линкозамидам и пенициллину. Использование чувствительных и устойчивых к антибиотикам штаммов было необходимо для установления связи между антибиотикорезистентностью и чувствительностью к действию порфиринов.
При изучении особенностей роста тест-штаммов в присутствии природных порфиринов не обнаружено какого-либо влияния этих соединений на накопление бактериальной биомассы как в темновых условиях, так и при облучении.
Поскольку в экспериментальных исследованиях использовались комплексы порфиринов с металлами, в частности, с Ni, Mn, Zn и Sn, было проведено определение влияния солей соответствующих металлов на рост микроорганизмов. Установлено, что количество накопленной биомассы всех штаммов, за исключением P. vulgaris и P. aeruginosa, в присутствии указанных соединений не отличается от контрольного значения. Рост P. vulgaris все исследованные соли несколько стимулировали, а у P. aeruginosa стимулирующий эффект наблюдался в присутствии NiSO4.

Структура заболеваемости, вызываемой условно-патогенными бактериями (гнойно-воспалительные болезни)

Структура заболеваемости, вызываемой  условно-патогенными бактериями
Следует отметить, что в зависимости от клинических особенностей гнойно-воспалительных болезней все обследованные пациенты распределялись следующим образом, а именно: у 297 человек, что составило 30,6 %, имели место острая кишечная патология, в частности у 251 больного нами были диагностированы острые пищевые токсикоинфекции, которые инициировались условно-патогенными бактериями. 46 человек заболели эшерихиозом. Всего от больных указанной группы нами выделено и идентифицировано 297 культур патогенов, которые далее стали объектом наших пристальных исследований. 
У 209 человек, что составило 21,5 %, гнойно-воспалительная  патология, вызывалась условно-патогенными бактериями, развились во время нахождения в терапевтических и хирургических стационарах. У этой части больных гнойно-воспалительные болезни носили характер поражения мягких тканей, а именно: карбункулы, постинъекционные абсцессы мягких тканей конечностей,  парапроктиты, флегмоны,  панариции и маститы. Всего из патологически изменненных участков тканей этой когорты больных нами было изолировано 375 культур гноеродных условно-патогенных бактерий. Выделенные от больных штаммы условно-патогенных бактерий отвечали по своим биологическим свойствам таковым, которые изолировались из окружающей среды (руки персонала, предметы ухода, воздух,  инвентарь и оснащение палат) и от медицинского обслуживающего персонала отделений, что позволило интерпретировать данные гнойно-воспалительные болезни как госпитальные (нозокомиальные) инфекции.
У 135 больных (13,9 %) манифестировались различные клинико-морфологические варианты гнойно-воспалительных заболеваний кожи (пиодермий). Поверхностные формы пиодермий диагностированы у 71 пациента, что составило 52,6 %, глубокие формы - у 64, что составило 47,4 %. Среди клинико-морфологических  форм поверхностных пиодермий наиболее частыми были, а именно: импетиго Тильбери-Фокса, остеофолликулит Бохкарта,  вульгарный сикоз, фолликулит, вульгарное импетиго. В группе больных с глубокими формами пиодермий диагностированы  язвенно-вегетирующие и язвенные варианты, рецидивирующий гидраденит, карбункулы и диссеминированный фурункулез. Всего из пораженных участков кожи больных пиодермиями было выделено 309 культур условно-патогенных бактерий.